Folin -酚试剂的配制
1、Folin-酚试剂甲:
将 1g Na 2 CO 3 溶于 50ml 0.2mol/L NaOH 中，再把 0.5g (硫酸铜) CuSO 4 ·5H2O 溶于100mL 1%的酒石酸钾钠(或酒石酸钠)溶液，然后将前者 50ml 与后者 1ml 混合，此试剂只能用一天，过期失效。
2、Folin-酚试剂⼄:
本试剂的浓度为 1mol/L，此为 Folin-酚试剂应用液。Folin-酚试剂平时应密封贮存于4℃冰箱中避光保存。
操作方法（仅供参考）:
以下步骤适用于蛋白浓度测定：
1）标准曲线的制作：
取 14 支试管分成两组，分别加入 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250µg/mL)，用水补足到 1mL，加入 5mL 试剂甲，混匀，于 20-25℃放置 10 分钟，再加入 0.5mL 试剂乙，立即摇匀，在 20-25℃保温 30 分钟，然后于 500nm 处比色。测定光密度值，取两组测定的平均值，以蛋白质浓度为横座标，光密度值为纵座标，绘制标准曲线值为定量的依据。
2）样品测定：
取 1mL样品溶液（约合 20-250µg/多肽或蛋白质）加入5mL试剂甲混匀，于20-25℃放置 10 分钟，再加0.5mL试剂乙（Folin-酚），立即摇匀，在 20-25℃保温 30 分钟，然后于 500nm 处比色，以 1mL 水代替样品作空白对照。测定后，可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。若用 0.5cm 光程的比色杯进行比色，可按下面方法进行操作:取 0.2mL样品溶液（约5-100µg 多肽或蛋白质）加入 1mL试剂甲（可选用 0.3-0.5cm 直径的小试管）混匀，10 分钟以后，再加入 0.1mL 试剂乙 ，立即混匀，30 分钟后比色。一般来说，若多肽或蛋白质的浓度在 2-25µg，测波长 755nm，而 25µg 以上则采用 500nm 比色为宜。
注意事项:
本说明书适用于蛋白定量检测，如需用于其他实验，请按参考文献进行。
本产品仅用于科研，不可用于其他。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
