溶解度:溶于浓盐酸、甲酸,微溶于醋酸、苯酚等溶剂,不溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、 氯仿和苯等常用有机溶剂,对碱较稳定,对酸的稳定性较差,尤其是无机酸,在温度更高时更敏感。
2. 主要用途:
聚酰胺特别适用于多元酚类化合物的分离,如大麻二酚 (CBD)、黄酮类、醌类、酚酸类、含 羟基化合物、羧基化合物等。由于其对鞣质吸附强,也可用于将植物粗提物中的鞣质除去。
3. 预处理:
取聚酰胺以 90-95%乙醇浸泡,不断搅拌,除去气泡后装入柱中。用 3-4 倍体积的 90-95%乙醇 洗脱,洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣 (或极少残渣) ,再依次使用 2-2.5 倍体积的 5% NaOH 水 溶液、1 倍体积的蒸馏水、2-2.5 倍体积的 10% 醋酸水溶液洗脱,最后用蒸馏水洗脱至 pH 中性,备 用。
4. 使用方法:
1) 装柱:一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中,使其充分膨胀,然后装柱,让聚酰胺自由沉降; 当用非极性溶剂系统时候,则用组分中低级性的溶剂装柱。
2) 稀释适当浓度上样:一般每 100mL 聚酰胺上样 1.5-2.5g ,样品先用洗脱溶剂溶解,浓度为 20%-30% 。水溶性化合物直接上样;若提取物水溶性不好,则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰 胺,挥干或减压蒸干,干法装入柱顶。
3) 水洗:先用水洗脱
4) 醇洗:在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液;或氯仿、氯仿- 甲醇、递增甲醇至纯甲醇洗脱。 若仍有物质未被洗脱,可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱,分段收集。
5) 找到最佳吸附比:先小量试验找到最佳吸附比
6) 放大:根据小试及最佳吸附比进行放大试验
7) 聚酰胺的回收:使用过的聚酰胺一般用 5% NaOH 溶液洗涤,然后水洗,再用 10% 醋酸液
洗,然后用蒸馏水洗至中性,即可。
5. 再生:
一般用 5% NaOH 溶液洗脱,洗至 NaOH 水溶液颜色极淡为止。有时因某些鞣质与聚酰胺有不 可逆吸附,用 NaOH 水溶液很难洗脱,可用 5% NaOH 在柱中浸泡,每天将柱中的 NaOH 水溶液放 出一次,并加入新的 5% NaOH 水溶液,这样浸泡一周后,鞣质基本可以洗脱干净,然后用蒸馏水 洗脱至 pH8-9 ,再用2 倍量的 10%醋酸水溶液洗脱,最后蒸馏水洗脱至 pH 中性,重复使用。
6. 低分子杂质去除方法:
1) 装柱前先过筛
2) 装柱时用 5%甲醇或 10%盐酸预先除去小分子杂质
7. 树脂有效使用期参考:
该树脂性能较稳定,由于样本和工艺条件的差异,因此树脂寿命由几个月到数年更换一次不等, 差异较大;一般再生后吸附量下降 30%以上时考虑更换树脂。
8. 应用 (仅供参考)
1) 黄酮类化合物的分离:
由于黄酮类化合物具有两个以上芳香核,且大多数化合物具有游离酚羟基,因此能够吸附在聚 酰胺柱上。由于苷元的吸附能力比苷强,一般苷在水或稀醇液洗脱时即可洗下,而苷元则需较浓的 醇液才能洗脱下来。
2) 酸类及酚类化合物的分离:
聚酰胺对脂肪族一元酸的吸附力较小,而对芳香族酸类及脂肪族多元酸的吸附能力较大,分离 效果较好。酚类物质用聚酰胺层析分离效果更好。
3) 鞣质的分离和去除:
鞣质是一类多酚性物质,很容易吸附在聚酰胺树脂柱上。低分子鞣质的吸附是可逆的,可采用 适当的溶剂洗脱而得到分离。高分子鞣质的吸附是不可逆的,吸附后很难洗脱。无论是低分子或是 高分子鞣质,它们与聚酰胺的吸附比其它的化合物都要强,因此可用聚酰胺去除鞣质。