试剂盒组成:
名称
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100T
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Storage
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试剂(A): Trypan Blue stain(2×)
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10ml
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4℃
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试剂(B): 细胞重悬液
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100ml
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4℃
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产品简介:
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit)是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝不被染色即拒染特性,而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色的原理研制而成。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性,通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的计算。
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒主要由Trypan Blue stain、细胞重悬液组成,1ml规格试剂大约可以染色10次。
操作步骤(仅供参考):
1. 收集细胞:
对于贴壁细胞先用胰酶和/或EDTA消化下细胞。对于悬浮细胞,则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000-2000g离心1分 钟,弃上清,用1毫升或根据细胞的量用适当细胞重悬液重新悬起细胞。
2. 台盼蓝染色:
吸取100微升重悬的细胞到一塑料离心管内,加入100微升台盼蓝染色液(2X),轻轻混匀,染色3分钟 (染色3分钟时间已经足 够,染色时间可以更长一些,但不宜超过10分钟)。 注:对于重悬于细胞培养液中的细胞,也可以直接加入等体积的台盼蓝染色液(2X)进行染色。
3. 计数:
吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项:
1.本试剂盒提供的两种溶液都是无菌的,使用时最好在超净台内进行,避免细菌污染。
2.本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在37ºC水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。
3.台盼蓝对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 Ø
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。