产品内容:
试剂名称
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规格
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保存温度
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rTEV蛋白酶(5U/μL)
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200μL
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-80℃
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10× Reaction Buffer
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500μL
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-20℃
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产品简介:
rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。 rTEV蛋白酶与肠激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性、高特异性的双重特点,rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合tag的首选蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. TL556)去除。
保存条件:
rTEV蛋白酶-80℃长期保存,可存储2年;首次使用后可置于-20℃保存,可储存6个月,避免反复冻融。10× Reaction Buffer可置于-20℃保存。
酶活定义:
在1×Reaction Buffer中,4℃反应12-16h,剪切>95%的5μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
使用方法说明:
- 推荐使用溶液:50 mM Tris-HCL,pH8.0,0.5mM EDTA,0.1% Tween-20(v/v),1mM DTT,中进行剪切。
- 10×Reaction Buffer:500 mM Tris-HCL,PH 8.0,5mM EDTA,1% Tween-20(v/v),10mM DTT
- 酶切体系:
融合蛋白 0.1mg
10×Reaction Buffer 10μL
rTEV蛋白酶 20U
定容至 100μL
定容缓冲液:50 mM Tris-HCL,pH8.0,0.5mM EDTA,0.1% Tween-20(v/v),1mM DTT
- 酶切条件:在4℃酶切12-16h。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件,可
适当加大酶量或延长酶切时间。
可取少量样本进行SDS-PAGE分析,若要去除酶切后体系中的rTEV蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。