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金克隆(北京)生物技术有限公司
fu DNA Ploymerase 是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase 基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kD。由于Pfu 酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA 扩增过程中产生的错配,而传统的Taq 酶却不能,其它耐热DNA Polymerase 如Vent、Deep Vent、Tli、UITma 等虽具有校正功能,但Pfu 酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase 中出错率最低的。Pfu 酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR 反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/min,比Taq 酶要低。Pfu 酶比Taq 酶热稳定性更好,95℃ 1 小时仍保持90%以上的活性,对于GC 含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu 酶的PCR 产物为平末端,可加A 处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。
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